超微量分光光度计本身就是一类很重要的分析仪器,无论是物理学、化学、生物学、医学、材料学、环境学等科学研究领域。超微量分光光度计不仅涵盖了可见光分光光度计的功能而且也可以进行紫外分光光度计的应用,更常用以下几方面:
1.比色法蛋白质定量
蛋白质通常是多种蛋白质的化合物,比色法测定的基础是蛋白质构成成分:氨基酸(如酪氨酸,丝氨酸)与外加的显色基团或者染料反应,产生有色物质。有色物质的浓度与蛋白质反应的氨基酸数目直接相关,从而反应蛋白质浓度。
2.蛋白质的直接定量(UV法)
这种方法是在280nm波长,直接测试蛋白。蛋白质测定过程非常简单,先测试空白液,然后直接测试蛋白质。蛋白质直接定量方法,适合测试较纯净、成分相对单一的蛋白质。紫外直接定量法相对于比色法来说,速度快,操作简单;但是容易受到平行物质的干扰,如DNA的干扰;另外敏感度低,要求蛋白的浓度较高。
3.UV-VIS常规可见-紫外检测
全波长超微量分光光度计可以像普通的紫外-可见分光光度计一样行使功能。如BIO-DL MicroDrop可以显示从185到910nm的光波下样品的吸光值。更多可以同时检测40个波长下的吸光值并把数据显示在报告中。
4.核酸的定量
核酸的定量是超微量分光光度计使用频率更高的功能。可以定量溶于缓冲液的寡核苷酸,单链DNA、双链DNA,以及RNA。核酸的更高吸收峰的吸收波长260nm。每种核酸的分子构成不一,因此其换算系数不同。定量不同类型的核酸,事先要选择对应消光因子。